Bradford 蛋白定量试剂盒

02NC00016

产品介绍 Bradford 蛋白定量法是最简单和快速的蛋白定量方法之一，可实现对浓度范围在 10-1000ug/ml 的蛋白质溶液经行定量。该定量的原理是考马斯蓝染料与蛋白质结合后，溶液的颜色发生变化（棕色变成蓝色），结合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因而可通过检测 595nm 的最大光吸收值的大小来计算蛋白的含量。本试剂盒可对含有还原剂的样品经行测定，但对于含有表面活性剂的样品的测定结果不稳定。 操作步骤 1.稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。 管号 稀释液用量（ul） BSA标准品用量（ul） BSA标准品最终浓度（ug/ml） A 0 100 2,000 B 50 150 1,500 C 200 200 1,000 D 200 200（从C管中取） 500 E 200 200（从D管中取） 250 F 200 200（从E管中取） 125 G 200 0 0(空白) 2. 将按表1稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品（原液或稀释液）各5ul分别加到作好标记的96孔微孔板中。 3. 每孔中加入 200ul Bradford Dye Solution ，充分混匀，盖上 96 孔板盖，室温放置 3-5 分钟。 注：Bradford Dye Solution 长时间放置可能会有沉淀产生，使用前晃动试剂瓶，使其重新混匀即可。 4. 酶标仪波长设定在595nm处经行吸光值测定（测定时间尽量控制在反应后的1小时以内）。 5. 各浓度的BSA标准品溶液的吸光值减去Blank值的平均值，绘制BSA标准品溶液的标准曲线，并根据BSA标准曲线计算出相应的检测样品的蛋白质浓度。 6. 如果所得到的蛋白质浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次进行测定。 保存条件 组分 规格 保存条件 Bradford Dye Solution 100ml 4 ℃ BSA Standard Solution （ 2mg/ml ） 2ml -20 ℃ 注意事项 1. 本产品可以采用分光光度计或酶标仪测定蛋白浓度 2. 建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，获得更准确数据 3. BSA标准品稀释液需和待测样品的稀释液一致 4. 建议去除背景值后的吸光度值读数绘制标准曲线，由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应舍去。 5. 如果得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。