彩色凝胶快速试剂盒(ExpressCast PAGE)

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ExpressCast PAGE 彩色凝胶快速试剂盒 产品介绍 ExpressCast PAGE 彩色凝胶快速试剂盒 是一种采用上层胶和下层胶的新型预混液，在传统凝胶配方 基础上进行了优化，仅需加入改进型促凝剂即可制胶，无需加 TEMED，避免恶臭气味。该产品支持一步法灌胶制备，不仅简化和缩短凝胶配制步骤和时间，而且兼容传统的 Laemmli 体系中的 Tris-Glycine 电泳缓冲液，可以在高电压下快速完成蛋白电泳。上层胶的缓冲液中加入了红色指示剂，使加样孔清晰可见， 方便加样。 产品特色  一步法灌胶制备，仅需加入改进型促凝剂即可，无需加 TEMED，避免恶臭气味  制备红色的上层胶，胶孔清晰可辨，方便加样  缩短凝胶电泳时间，150V 条件下，40-60 分钟即可完成电泳  兼容传统的 Tris-Glycine 电泳缓冲液, 稳定性好，分辨率高，条带更加清晰 操作步骤 一步法灌胶制备：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例 1. 分别量取等体积的下层胶溶液 2.5ml 和下层胶缓冲液 2.5ml，轻柔混匀。 2. 分别量取等体积的上层胶溶液 0.75ml 和上层胶缓冲液 0.75ml，轻柔混匀 （ 注意：由于红色颜料的理化性质，使用前请摇匀） 。 3. 向步骤 1 的混合溶液中，加 50ul 改进型促凝剂，轻柔混匀，灌入制胶板内，使液面与短玻璃板上沿之 间的距离比梳齿长 0.5cm。 ( 注意：溶液为过量，请勿全部灌入） 。 4. 向步骤 2 的混合液中，加 15ul 改进型促凝剂，轻柔混匀，无需等待下层胶凝固，直接将混匀的溶液轻 缓灌入制胶板内，插入梳子。 ( 注意：上层胶灌入时一定要轻缓，避免将上层胶溶液冲入下层胶溶液中） 。 5. 等胶凝固后（约 20-30 min)，取出梳子，上样, 在 Tris-Glycine 电泳缓冲液体系中, 电压 150V, 电 泳 40-60 分钟。 ( 注意：胶凝固后，上下层胶分界线平整度弱于常规两步法配制的胶，但对后续电泳没有影响，也可以按下述步骤常规两步法制胶） 。 两步法灌胶制备：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例 （一）下层胶配制：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例 1. 分别量取等体积的下层胶溶液 2.5ml 和下层胶缓冲液 2.5ml，轻柔混匀。 2. 加入 50ul 改进型促凝剂至上述混合液中，混匀。 3. 将配制好的溶液，灌入制胶板内, 加入适量的醇或水，压平分离胶，待下层胶凝固后（15-30 分钟）， 弃去上层水或醇，用滤纸吸取多余的水或醇。 （二）上层胶配制 1. 分别量取等体积的上层胶溶液 0.75ml 和彩色上层胶缓冲液 0.75ml，轻柔混匀。 注意：由于红色颜料的理化性质，使用前请摇匀。 2. 加入 15ul 改进型促凝剂至上述混合液中，混匀。 3. 将配制好的溶液, 灌入制胶板内，缓慢插入梳子。 4. 待上层胶凝固后（15-30 分钟），取出梳子，上样, 在 Tris-Glycine 电泳缓冲液体系中, 电压 150V, 电泳 40-60 分钟。 成分及保存条件 注意事项： 1. 丙烯酰胺有神经毒性，请穿戴实验服及口罩经行相关的实验。 2. 本品加入红色颜料，上层胶浓缩效果比常规胶要弱，经过内部成分的优化，与传统凝胶相比，对蛋白条带分离效果更好，分辨率更高，蛋白条带更窄更锐利。 3. 改进型促凝剂的用量仅供参考，量越多的促凝剂可加速凝胶，反之亦然；凝胶速度与温度成显著正相关， 温度越高凝胶速度越快，温度越低凝胶速度越慢，实际用量根据个人实验习惯经验及环境适当调整。 4. 本产品已加入适量的 TEMED 替代品，如需要进一步提高凝胶速度，可按需补充适量 TEMED。 5. 为避免凝胶中气泡的形成，建议在配胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温（如室温放置几分钟）。